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产品简介

本试剂盒采用磁珠吸附 DNA 的方法从各种琼脂糖凝胶中提取 DNA(70bp-10kb),回收效率为 60-85%。

产品信息

Buffer DE-A:凝胶熔化剂,含 DNA 保护剂,防止 DNA 在高温下降解。室温密封储存。
Beads:磁珠溶液,4℃ 密封储存。
Eluent:洗脱液,室温密封储存。

操作流程

使用前准备
       70% 乙醇
       磁性分离器(Cat.60201)

1.在紫外灯下切下含有目的DNA的琼脂糖凝胶,用纸巾吸尽凝胶表面液体并切碎。计算凝胶重量(提前记录EP管重量),该重量作为一个凝胶体积(如100mg=100μL 体积)。

2.加入3倍凝胶体积的buffer DE-A,混合均匀后于75℃加热(低熔点琼脂糖凝胶于40℃加热),间断混合(每2-3min),直至凝胶块完全熔化(约6-8min)。

3.加入0.5倍buffer DE-A体积的磁珠溶液(beads),颠倒混匀5-8次。

4.室温放置5min,放置过程中,颠倒混匀3-5次。

5.将反应管置于磁性分离器上静置30s,直至磁珠全部吸附至管壁,上清澄清后,吸弃液体。
        a)勿将磁珠吸出;
        b)弃液体后,勿将反应管从磁性分离器上取出。

6.加入200μL 70%乙醇,在室温下放置30s。吸弃液体。重复操作1次。
        a)勿将磁珠吸出;
        b)弃液体后,勿将反应管从磁性分离器上取出;
        c)尽量吸尽管内残留液体。

7.让磁珠反应管保持在磁性分离器上,室温干燥3-5min。
        a)保持反应管置于磁性分离器上;
        b)勿使磁珠过分干燥,否则将影响DNA得率。

8.移去磁力架,加入30-50μL Eluent(或去离子水),用移液器吸头轻轻吹打管壁磁珠,直至分布均匀。静置2min。

9.将反应管置于磁性分离器上,静置直至磁珠全部吸附在管壁,吸取上清转移到新的离心管中,即得到高纯度的DNA。

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